 |
Mínimos de Recomendaciones Técnicas
OBTENCIÓN Y MANIPULACIÓN DE MUESTRAS
1. Tiempo desde extracción hasta congelación:
Ha de procurarse reducir al mínimo posible el tiempo desde la extracción de un tejido hasta su congelación para evitar los procesos degradativos derivados de la isquemia. Un parte importante de ese tiempo es el debido al retraso en la llegada al servicio de Anatomía Patológica.
Se considera que los mínimos aceptables deben ser:
30 minutos si se pretende preservar el RNA y 1 h.para DNA. Pueden variar al aumento cuando el tejido es abundante y el órgano poco enzimático (músculo, conjuntivo, tumoral).
Puesto que es difícil prever el futuro uso, se recomienda obtención de los tejidos como si fuera para RNA.
2. Instrumental y lugar de trabajo:
El ideal sería trabajar en condiciones de esterilidad (campana de flujo laminar) para evitar la contaminación de las muestras, lo cual es impracticable en nuestro medio. Por ello se ha de exigir, al menos:
- Usar superficie limpia (papel desechable)
- guantes y material limpio (estéril cuando sea posible)
- Cambiar de instrumental entre dos muestras.
3. Selección de muestras:
Siempre se llevará a cabo por un patólogo o residente con suficiente formación.
Se evitarán las zonas sospechosas de contener necrosis o de ser poco representativas de la lesión. Se procurará tomar tejido normal cuando sea posible.
CONGELACIÓN:
1.- Técnicas de congelación aceptables:
a) Sumersión en isopentano frio (directa o en molde de OCT)
b) N2 liquido, preferiblemente en fase gaseosa.
El tejido congelado se puede introducir en tubos o moldes con OCT.
Nota: evitar congelación lenta a –20 en criostato o en congelador de -80 .
2.- Equipo:
Preferible 1 Histobath (refrigerador de isopentano a –50). También se puede mantener frío en congelador de -80.
EQUIPO DE ALMACENAMIENTO:
Se considera que, como mínimo, se ha de contar con 1 congelador vertical u horizontal a –80, o cuba de N2.
Cualquiera que sea el sistema, ha de contar con sistema de alarma local y remota.
Muy conveniente que exista un circuito de emergencia de N2.
Muy recomendable la existencia de una unidad de reserva ( backup) propia o disponible en otro servicio.
BASE DE DATOS:
- Debe cumplir la Ley Orgánica de Protección de datos (acceso, registro, etc).(ver recomendaciones sobre aspectos ético-legales)
- Debe ser interconectable en red regional y interregional.
- Debe contener información anonimizada (claves de desanonimización)
- Debe haber un acceso por niveles restringidos
PERSONAL:
- 1 técnico de laboratorio a tiempo completo (para grandes hospitales) o parcial
- 1 patólogo responsable de toma de muestras, control de calidad e interlocución con red y grupos de investigación.
ESPACIO:
Se considera que el espacio necesario debe ajustarse a la disponibilidad en cada institución, siendo el mínimo el espacio necesario para el buen funcionamiento de los equipos de congelación, de los procesos de toma de muestras y del equipo informático.
No obstante, es recomendable un espacio de trabajo para el personal encargado (técnico y técnico informático si lo hubiera).
|
|
