SUBPROGRAMA DE DIAGNÓSTICO MOLECULAR DE TUMORES PEDIÁTRICOS SÓLIDOS
SUBPROGRAMA DE DIAGNÓSTICO MOLECULAR DE TUMORES PEDIÁTRICOS SÓLIDOS
Subcordinador: Dr S Navarro, Hospital Clínico, Valencia1. Justificación del subprograma
Los tumores sólidos infantiles constituyen un grupo heterogéneo de neoplasias en las cuales no solo es prioritario definir los criterios de diagnostico especifico, basados en el fenotipo tumoral sino que el pronostico de los niños afectos va estar condicionado por factores biológicos fenotípicos y genotípicos cuyo análisis es requisito indispensable para la aplicación de las diferentes estrategias terapéuticas definidas por los protocolos cooperativos internacionales de Oncología Pediátrica.
Este subprograma incluye las actividades desarrolladas previamente por la Red de Tumores Pediátricos en el ámbito del diagnóstico en tumores pediátricos y que fueron evaluadas como Excelentes. La peculiaridad e integración del diagnóstico oncológico pediátrico y la excelente coordinación existente entre los grupos aconseja mantener la misma estructura que se había implementado en la red previa
2. Objetivos
- Realizar como plataforma de servicio la determinación de los diferentes parámetros biológicos, particularmente genéticos y moleculares, que influyen en el diagnostico, pronostico y tratamiento de tumores sólidos pediátricos.
- Protocolizar los métodos diagnósticos y ofrecer la experiencia de la red a los centros que necesiten asesoramiento
- Desarrollar actividades de control de calidad en el diagnóstico genético y molecular de tumores sólidos pediátricos
- Promover actividades de formación en el diagnostico de tumores pediátricos
3. Servicio, Metodología y Técnicas
El ámbito de servicio va estar dirigido fundamentalmente al grupo de tumores de celulas redondas de la infancia y adolescencia, con especial énfasis en los tumores neuroblásticos , en los que actuamos como laboratorio de referencia de la Sociedad Española de Oncologia Pediátrica. Los servicio y actividades especificas que se desarrollan son:
1. Recepción de muestras remitidas al laboratorio de referencia desde los Hospitales Pediátricos.
Se reciben fragmentos de tumor congelados en nieve carbónica, así como material incluido en parafina y en medio Standard de cultivo celular.
2. Tumores neuroblásticos, se realizan los siguientes procedimientos:
- Caracterizacion morfologica y evaluacion histopronostica siguiendo la clasificacion INPC (Sistema Shimada).
- Caracterizacion inmunofenotipica (marcadores neurales, NB84).
- Estudio de la ploidia por citometria estatica
- Estudio de expresión de oncoproteina MYCN
- Estudio de status del encogen MYCN por PCR/FISH
- Estudio de ganancias y perdidas cromosomicas (1p-, 17q+, 11q-,14q-,etc), mediante tecnica de FISH y CGH.
3. Tumores de Ewing-PNET se realizaran los siguientes estudios:
- Caracterizacion del subtipo histologico y estudio ultrastructural.
- Caracterizacion inmunofenotipica (CD99, Fli1, y otros marcadores neurales).
- Estudio de la fusion genica EWS/ETS mediante tecnicas de FISH, RT-PCR y secuenciacion.
- Estudio de ganancias y perdidas cromosomicos por tecnicas de CGH.
4. Rabdomiosarcomas, se realizaran los siguientes estudios:
- Caracterizacion histopatologica y ultrastructural
- Caracterizacion inmunofenotipica con marcadores miogenicos (actina, desmina, miogenina, MyoD1).
- Estudio molecular de fusion genica PAX7/FKHR y PAX3/FKHR.
5. Tumores desmoplasicos de celulas redondas se realizaran los siguientes estudios:
- caracterizacion morfologica y ultrastructural.
- Caracterizacion inmunofenotipica con marcadores neurales, musculares , epiteliales.
- Caracterizacion molecular de la fusion EWS/WT1 por tecnicas de FISH y PCR.
6. Sarcoma sinovial, se realizaran los siguientes estudios:
- Caracterizacion morfologica
- Caracterizacion inmunofenotipica
- Caracterizacion molecular con el estudio de fusiones SYT/SSX1 y SYT/SSX2.
5. Grupos que constituyen la plataforma de servicios
Hospital Clínico, Universidad de Valencia, Sub cordinador Dr S Navarro
Centro de Investigación del Cáncer, Dr Enrique de Alava
Hospital Vall D´Hebron, Dr Josep Sanchez de Toledo
El grupo del grupo del Departamento de Patologia del Hospital Clinico de la Universidad de Valencia (DP-UV) realizara su aportación al programa transversal como laboratorio de referencia de la sociedad española de Oncologia Pediátrica en la determinación y analisis de factores fenotipicos y genotipicos de los casos de tumores neuroblásticos remitidos de los distintos hospitales pediátricos, así como de otros tumores de células redondas.
El grupo del Dr Enrique de Alava realizará fundamentalmente estudios moleculares en tumores de Ewing, PNET, tumores desmoplásicos de células redondas y sarcomas sinoviales. Está particularmente especializado como laboratorio de referencia en la detección mediante FISH en material de parafina de translocaciones de estos y otros sarcomas, realización de arrays de CHG de sarcomas y tumores neuroblásticos, así como su integración en el diagnóstico anatomopatológico.
El Hospital Vall d’Hebron, estrará más dedicado al estudio molecular de rabdomiosarcomas.
Las actividades que se desarrollaran en los próximos cuatro años son:
· Determinación y Análisis de Factores fenotípicos y genotipos con implicación diagnostica, pronóstica y terapéutica en Tumores neuroblásticos: Aplicación de toda la tecnología descrita en el apartado metodológico en aproximadamente 100 nuevos casos/año de neuroblastomas primarios. Análisis de los mismos factores en 100 casos/año post-tratamiento.
· Analisis de los factores fenotipicos y genotipicos descritos en el apartado metodológico en aproximadamente 30 nuevos casos de tumor de Ewing/PNET, 30 casos de rabdomiosarcoma, 20 casos de sarcoma sinovial.
· Intercambio de muestras con resto de grupos afines del programa transversal
BIBLIOGRAFIA
Navarro, S, Amann,G, Beiske, K, et al. Prognostic value of internacional neuroblastoma pathology classification in localizad resectable peripheral neuroblastic tumors: a histopathologic study of localized neuroblastoma european study group 94.01 trial and protocol. J Clin Oncol 24.695-699, 2006
Brodeur,GM. Neuroblastoma: biological insights into a clinical enigma. Nat Rev Cancer,3:203-16, 2003.
de Alava E, Gerald WL. “Biology of Neoplasia. Ewing’s sarcoma and related tumors. Tumor biology and clinical applications”. J Clin Oncol 2000;18 204-213
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